美國abraxis腹瀉性貝類毒素(DSP)ELISA檢測試劑盒
概述
腹瀉性貝類毒素檢測試劑盒的原理是酶聯免疫吸附測定法,用於水及水產品中腹瀉性貝類毒素的定量測定。岡田酸是腹瀉性貝類毒素的一種。對於水產品需要做前處理,不可以直接檢測。如果需要的話陽性樣品可以通過HPLC和GC/MS來驗証。
保存和穩定性
試劑盒應保存在2-8℃,不要冷凍。在使用之前要把試劑盒中的溶液回復到室溫(20-25℃)。有效期內試劑盒中的試劑都可以使用。
原理
試劑盒的原理是直接競爭ELISA法,通過特異性抗體來識別岡田酸。當樣品中含有岡田酸時,樣品中的岡田酸與岡田酸酶結合物競爭結合溶液中的岡田酸抗體。岡田酸抗體與包被在微孔板上的羊抗鼠二抗結合。經過一步洗滌加入底物溶液,產生有色反應。產生的綠色的顏色深度與樣品中岡田酸的含量成反比。加入反應停止液后使顏色由藍色轉變為黃色。用酶標儀在450nm處測定吸光度值。通過繪製標準曲線來計算樣品中岡田酸的含量。
7.試劑盒特性
敏感性:1.7ng/ml
重複性:標準的變異係數小於10%,樣品的變異係數小於15%
特異性:
腹瀉性貝類毒素檢測試劑盒能檢測Okadaic acid及其它DSP,它們的結合程度是不同,以下表格中展示的是相關值及交叉反映率(%CR),以下所有濃度均為ppb級。
種 類 |
% CR |
種 類 |
% CR |
Okadaic Acid (DTX) |
100% |
Dinophysistoxins DTX-2 |
50% |
Dinophysistoxins DTX-1 |
50% |
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樣品:水樣和貝類產品
A.試劑盒組成:
1、包被二抗的微孔板(羊抗兔)
2、標準(7種)0、0.1、0.2、0.5、1.0、2.0、5.0、ng/ml
3、岡田酸抗體溶液(兔抗岡田酸)6ml
4、岡田酸酶標記物6ml
5、樣品稀釋液(10倍濃縮)25ml,用於稀釋樣品
6、5x 濃縮洗液100ml
7、顯色液(底物)TMB,16ml
8、終止液12ml